phytosanitaryФитосанитария. Карантин растенийPlant Health and Quarantine2782-327X10.69536/FKR.2026.50.73.004phytosanitary-221Research ArticleДИАГНОСТИКАDIAGNOSTICSРазработка и валидация методов диагностики вируса карликовости пшеницы (Mastrevirus hordei)Development and validation of methods for diagnosing Wheat dwarf virus (WDV) (Mastrevirus hordei)https://orcid.org/0000-0001-8612-5127ЛозоваяЕ. Н.LozovayaE. N.

Лозовая Евгения Николаевна, научный сотрудник отдела аспирантуры

пгт Быково, м. о. Раменский, Московская обл., 140150

Evgenia Lozovaya, Researcher, Postgraduate Department

Bykovo, Ramenskoye, Moscow Oblast, 140150

evgeniyaf@mail.ruhttps://orcid.org/0009-0004-9176-407XПриходькоЮ. Н.PrikhodkoY. N.

Приходько Юрий Николаевич, кандидат сельскохозяйственных наук, ведущий научный сотрудник научно-методического отдела вирусологии

пгт Быково, м. о. Раменский, Московская обл., 140150

Yuri Prikhodko, PhD in Agriculture, Leading Researcher, Research and Methodology Department of Virology

Bykovo, Ramenskoye, Moscow Oblast, 140150

prihodko_yuri59@mail.ruhttps://orcid.org/0009-0008-8312-2666ЖиваеваТ. С.ZhivaevaT. S.

Живаева Татьяна Степановна, научный сотрудник научно-методического отдела вирусологии

пгт Быково, м. о. Раменский, Московская обл., 140150

Tatiana Zhivaeva, Researcher, Research and Methodology Department of Virology

Bykovo, Ramenskoye, Moscow Oblast, 140150

zhivaeva.vniikr@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9014-4179БашкироваИ. Г.BashkirovaI. G.

Башкирова Ида Геннадьевна, кандидат биологических наук, научный сотрудник научнометодического отдела вирусологии

пгт Быково, м. о. Раменский, Московская обл., 140150

Ida Bashkirova, PhD in Biology, Researcher, Research and Methodology Department of Virology

Bykovo, Ramenskoye, Moscow Oblast, 140150

bashkirovaid@mail.ruЕмельяноваА. А.EmelyanovaA. A.

Емельянова Анастасия Александровна, младший научный сотрудник научно-методического отдела вирусологии

пгт Быково, м. о. Раменский, Московская обл., 140150

Anastasia Emelyanova, Junior Researcher, Research and Methodology Department of Virology

Bykovo, Ramenskoye, Moscow Oblast, 140150

6ibsh505505@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-7565-1241ШнейдерЮ. А.ShneyderY. A.

Шнейдер Юрий Андреевич, кандидат биологических наук, начальник научно методического отдела вирусологии, ведущий научный сотрудник; доцент кафедры защиты растений

пгт Быково, м. о. Раменский, Московская обл., 140150

г. Москва, 127434

Yuri Shneyder, PhD in Biology, Head of Research and Methodology Department of Virology, Leading Researcher; Associate Professor of the Plant Protection Department

Bykovo, Ramenskoye, Moscow Oblast, 140150

Moscow, 127434

yury.shneyder@mail.ruФГБУ «Всероссийский центр карантина растений» (ФГБУ «ВНИИКР»)РоссияAll-Russian Plant Quarantine Center (FGBU “VNIIKR”)Russian FederationФГБУ «Всероссийский центр карантина растений» (ФГБУ «ВНИИКР»); ФГБОУ ВО «Российский государственный аграрный университет – МСХА имени К. А. Тимирязева» (ФГБОУ ВО РГАУ-МСХА им. К. А. Тимирязева)РоссияAll-Russian Plant Quarantine Center (FGBU “VNIIKR”); Russian State Agrarian University – Moscow Timiryazev Agricultural AcademyRussian Federation202606032026013856Copyright © Лозовая Е.Н., Приходько Ю.Н., Живаева Т.С., Башкирова И.Г., Емельянова А.А., Шнейдер Ю.А., 20262026Лозовая Е.Н., Приходько Ю.Н., Живаева Т.С., Башкирова И.Г., Емельянова А.А., Шнейдер Ю.А.Lozovaya E.N., Prikhodko Y.N., Zhivaeva T.S., Bashkirova I.G., Emelyanova A.A., Shneyder Y.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://phytosanitary.vniikr.ru/jour/article/view/221

Вирус карликовости пшеницы (Wheat dwarf virus, или Mastrevirus hordei; акроним – WDV) является вредоносным патогеном пшеницы, ячменя, ржи, тритикале, овса и многочисленных видов многолетних злаковых трав. Потери урожая пшеницы в результате заражения этим вирусом могут достигать 100%. Переносчиком WDV является полосатая цикадка (Psammotettix striatus L.), широко распространенная на территории РФ.Для разработки методических рекомендаций по выявлению и идентификации WDV было проведено испытание тест-системы для ИФА фирмы Loewe Biochemica GmbH (Германия), двух тест-систем для ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ) и семи пар праймеров для классической ПЦР.Установлено, что испытуемая тест-система для ИФА к WDV характеризуется достаточно высокой специфичностью к целевому объекту и может быть рекомендована для проведения скрининговых тестов на наличие этого вируса. Аналогичное заключение сделано также в отношении праймеров и зонда RTIC-F/ RTIC-R/ RTIC-Probe (Wang et al., 2016), которые позволяют диагностировать изоляты штаммов WDV-B и WDV-W с высокой специфичностью, чувствительностью и воспроизводимостью тестов. Установлено, что праймеры WDV-40F/WDV-806R и WDV-WFb/WDV-WRb позволяют диагностировать изоляты штаммов WDV-W и WDV-B, тогда как праймеры WDV-F/WDVR, WDV-T-F/WDV-T-R и WDV-1F/WDV-WRb характеризуются специфичностью к штамму WDV-W, а праймеры WDV-H-F/WDV-H-R и WDV-WFb/WDV-4R – специфичностью к штамму WDV-B. Для проведения подтверждающих тестов на наличие WDV отработаны протоколы классической ПЦР с праймерами WDV-WFb/WDV-WRb и WDV-F/WDV-R, обеспечивающие высокую эксклюзивность, инклюзивность и чувствительность тестов.

Wheat dwarf virus (WDV), or Mastrevirus hordei, is a harmful pathogen of wheat, barley, rye, triticale, oats, and numerous species of perennial cereal grasses. Wheat yield losses due to infection by this virus can reach 100%. WDV is transmitted by Psammotettix striatus L. Widely spread in the Russian Federation.To develop guidelines for the detection and identification of WDV, a test system for ELISA by Loewe Biochemica GmbH (Germany), two test systems for real-time PCR and 7 pairs of primers for classical PCR were tested.The WDV ELISA test system tested was found to be characterized by a sufficiently high specificity for the target and can be recommended for screening tests for this virus. A similar conclusion was reached regarding the RTIC-F/RTIC-R/RTIC-Probe primers and probe (Wang et al., 2016), which enable the diagnosis of WDVB and WDV-W isolates with high specificity, sensitivity, and reproducibility. It was established that the WDV40F/WDV-806R and WDV-WFb/WDV-WRb primers enable the diagnosis of isolates of the WDV-W and WDV-B strains, while the WDV-F/WDV-R, WDV-TF/WDV-T-R and WDV-1F/WDV-WRb primers are characterized by specificity to the WDV-W strain, and the WDV-H-F/WDV-H-R and WDV-WFb/WDV-4R primers are specific to the WDV-B strain. To conduct confirmatory tests for the presence of WDV, classical PCR protocols with the WDV-WFb/WDV-WRb and WDV-F/WDV-R primers have been developed, ensuring high exclusivity, inclusiveness and sensitivity of tests.

Иммуноферментный анализмолекулярная диагностикаполимеразная цепная реакцияпраймерысеквенирование.Enzyme-linked immunosorbent assaymolecular diagnosticspolymerase chain reactionprimerssequencing.ReferencesБей-Биенко Т.Я. Насекомые и клещи – вредители сельскохозяйственных культур. Том 1. Насекомые с неполным превращением// Л.: Наука. – 1972. – 214 с.Bey-Bienko T. Ya. Insects and mites – pests of agricultural crops [Nasekomyye i kleshchi – vrediteli selskokhozyaystvennykh kultur]. Volume 1. Insects with incomplete metamorphosis// L.: Science. – 1972. – 214 p. (In Russ.)Живаева Т.С., Приходько Ю.Н., Лозовая Е.Н., Шнейдер Ю.А., Башкирова И.Г., Каримова Е.В. Разработка и валидация методов диагностики вируса полосатой мозаики пшеницы (WSMV). Фитосанитария. Карантин растений. 2025. № 2 (23). С. 62–77. DOI: 10.69536/FKR.2025.52.35.004Zhivaeva T.S., Prikhodko Yu.N., Lozovaya E.N., Shneyder Yu.A., Bashkirova I.G., Karimova E.V. Development and validation of methods for diagnosing wheat streak mosaic virus (WSMV). Plant Health and Quarantine. 2025; 2(23):62-77 . DOI 10.69536/FKR.2025.52.35.004Кулакова Ю.Ю., Орлова Ю.В., Омельяненко Т.З., Комаров Д.А., Кулаков В.Г. Горчак ползучий: история расселения вида в Крыму и Поволжье // Фитосанитария. Карантин растений. – 2022. – № 4 (12). – С. 2–15. – DOI 10.69536/n8968-0127-4785-m.Kulakova Yu.Yu., Orlova Yu.V., Omelyanenko T.Z., Komarov D.A., Kulakov V.G. Acroptilon repens (L.) DC.: the history of the species spreading in the Crimea and the Volga region// Plant Health and Quarantine. 2022; 4 (12): 2-15.– DOI 10.69536/n8968-0127-4785-m.Орлов В.Н. Вредители зерновых колосовых культур// М.: Печатный Город. – 2006. – 104 с.Orlov V.N. Pests of cereal crops [Vrediteli zernovykh kolosovykh kultur] // M.: Pechatny Gorod. 2006. 104 p. (In Russ.)Приходько Ю.Н., Живаева Т.С., Лозовая Е.Н., Селявкин С.Н., Шнейдер Ю.А., Пручкина М.А., Каримова Е.В. Серомониторинг вирусов пшеницы (2021-2023 гг.) Фитосанитария. Карантин растений. 2024. № S2-1 (18). С. 44.Prikhodko Yu.N., Zhivaeva T.S., Lozovaya E.N., Selyavkin S.N., Shneyder Yu.A., Pruchkina M.A., Karimova E.V. Seromonitoring of wheat viruses (20212023) Plant Health and Quarantine. 2024; S2-1 (18): 44.Хорина Н.А., Лопаткин А.А., Живаева Т.С., Приходько Ю.Н., Шнейдер Ю.А. Вирус штриховатой мозаики ячменя – опасный патоген, влияющий на экспортный потенциал Российской Федерации Фитосанитария. Карантин растений. 2023. № 1 (13). С. 32-46. DOI: 10.69536/x7079-1718-0013-zKhorina N.A., Lopatkin A.A., Zhivaeva T.S., Prikhodko Yu.N., Schneider Yu.A. Barley stripe mosaic virus – a serious pathogen affecting the export potential of the Russian Federation. Plant Health and Quarantine. 2023; 1 (13): 32-46. DOI: 10.69536/x7079-1718-0013-zAbt I., Souquet M., Gersende Angot G., Romain Mabon R., Dallot S., Gaël Thébaud G., Jacquot E. Functional transcomplementation between Wheat dwarf virus strains in wheat and barley// Viruses. – 2020, 12, 34. – http://dx.doi.org/10.3390/v12010034.Abt I., Souquet M., Gersende Angot G., Romain Mabon R., Dallot S., Gaël Thébaud G., Jacquot E. Functional transcomplementation between Wheat dwarf virus strains in wheat and barley// Viruses. – 2020, 12, 34. – http://dx.doi.org/10.3390/v12010034.Brunt A.A., Crabtree K., Dallwitz M.J., Gibbs A.J., Watson L. Zurcher E.J. (eds.) Wheat dwarf monogeminivirus// Plant Viruses Online: Descriptions and Lists from the VIDE Database. Version: 20th August 1996. – URL http://biology.anu.edu.au/Groups/MES/vide/.Brunt A.A., Crabtree K., Dallwitz M.J., Gibbs A.J., Watson L. Zurcher E.J. (eds.) Wheat dwarf monogeminivirus// Plant Viruses Online: Descriptions and Lists from the VIDE Database. Version: 20th August 1996. – URL http://biology.anu.edu.au/Groups/MES/vide/.CABI, 2025. Wheat dwarf virus// CABI Crop Protection Compendium. – https://doi.org/10.1079/cabicompendium.CABI, 2025. Wheat dwarf virus// CABI Crop Protection Compendium. – https://doi.org/10.1079/cabicompendium.Hao Y., Wang Y., Chen Z., Bland D., Li S., BrownGuedira G., et al. A conserved locus conditioning Soilborne wheat mosaic virus resistance on the long arm of chromosome 5D in common wheat// Mol. Breed. – 2012. – Vol.30. – P. 1453–1464.Hao Y., Wang Y., Chen Z., Bland D., Li S., BrownGuedira G., et al. A conserved locus condition-ing Soilborne wheat mosaic virus resistance on the long arm of chromosome 5D in common wheat// Mol. Breed. – 2012. – Vol.30. – P. 1453–1464.Hall T.A. 1999. BioEdit: a user-friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT. Nucl. Acids. Symp. Ser.41: 95–98.Hall T.A. 1999. BioEdit: a user-friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT. Nucl. Acids. Symp. Ser.41: 95–98.Kundu J., Gadiou S., Červená G. Discrimination and genetic diversity of Wheat dwarf virus in the Czech Republic// Virus genes. – 2009. – Vol.38. – P. 468–474.Kundu J., Gadiou S., Červená G. Discrimination and genetic diversity of Wheat dwarf virus in the Czech Republic// Virus genes. – 2009. – Vol.38. – P. 468–474.Lemmetty A., Huusela-Veistola E. First report of Wheat dwarf virus in winter wheat in Finland// Plant Disease. – 2005. – Vol.89. – P. 912–912.Lemmetty A., Huusela-Veistola E. First report of Wheat dwarf virus in winter wheat in Finland// Plant Disease. – 2005. – Vol.89. – P. 912–912.Lindblad M., Waern P. Correlation of wheat dwarf incidence to winter wheat cultivation practices// Agriculture, Ecosystems & Environment. – 2002. – Vol.92. – P. 115–122.Lindblad M., Waern P. Correlation of wheat dwarf incidence to winter wheat cultivation practices// Agriculture, Ecosystems & Environment. – 2002. – Vol.92. – P. 115–122.Manurung B., Witsack W., Mehner S., Grüntzig M., Fuchs E. The epidemiology of Wheat dwarf virus in relation to occurrence of the leafhopper Psammotettix alienus in Middle-Germany// Virus Research. – 2004. – Vol. 100. – P. 109–113.Manurung B., Witsack W., Mehner S., Grüntzig M., Fuchs E. The epidemiology of Wheat dwarf virus in relation to occurrence of the leafhopper Psammotettix alienus in Middle-Germany// Virus Research. – 2004. – Vol. 100. – P. 109–113.Mishchenko L., Dunich A., Mishchenko I., Dashchenko A., Boyko O., Skufinskyi O., Kyrychenko A., Kozub N., Mukha T. Wheat dwarf virus and its impact on the 2020 harvest in some regions of Ukraine// Karantin i zahist roslin. – 2021. – №1 (264). – С. 3–9.Mishchenko L., Dunich A., Mishchenko I., Dashchenko A., Boyko O., Skufinskyi O., Kyrychenko A., Kozub N., Mukha T. Wheat dwarf virus and its impact on the 2020 harvest in some regions of Ukraine// Karantin i zahist roslin. – 2021. – №1 (264). – С.3-9.Mishchenko L.T., Dunich A.A., Mishchenko I.A., Dashchenko A.V., Kozub N.O., Kyslykh T.M., Molodchenkova O.O. Wheat dwarf virus in Ukraine: occurrence, molecular characterization and impact on the yield// Journal of Plant Diseases and Protection. – 2022. – Vol.129 (1). – P.107-116.Mishchenko L.T., Dunich A.A., Mishchenko I.A., Dashchenko A.V., Kozub N.O., Kyslykh T.M., Molodchenkova O.O. Wheat dwarf virus in Ukraine: occurrence, molecular characterization and impact on the yield// Journal of Plant Diseases and Protection. – 2022. – Vol.129 (1). – P. 107–116.Nygren J.N., Shad N., Kvarnheden A., Westerbergh A. Variation in susceptibility to Wheat dwarf virus among wild and domesticated wheat// PloS One. – 2014. – 10, e0121580-e0121580.Nygren J.N., Shad N., Kvarnheden A., Westerbergh A. Variation in susceptibility to Wheat dwarf virus among wild and domesticated wheat// PloS One. – 2014. – 10, e0121580-e0121580.Pfrieme A.-K., Will T., Pillen K., Stahi A. The past, present, and future of Wheat dwarf virus management-A review//Plants. 2023, 12(20), 3633; https://doi.org/10.3390/plants12203633.Pfrieme A.-K., Will T., Pillen K., Stahi A. The past, present, and future of Wheat dwarf virus management-A review//Plants. 2023, 12(20), 3633; https://doi.org/10.3390/plants12203633.Širlová L., Vacke J., Chaloupkova M. Reaction of selected winter wheat varieties to autumnal infection with Wheat dwarf virus// Plant Protection Science. – 2005. – Vol.41. – P. 1-7.Širlová L., Vacke J., Chaloupkova M. Reaction of selected winter wheat varieties to autumnal infection with Wheat dwarf virus// Plant Protection Science. – 2005. – Vol.41. – P. 1–7.Tamura K., Stecher G., and Kumar S. (2021) MEGA11: Molecular Evolutionary Genetics Analysis version 11. Molecular Biology and Evolution 38:3022-3027.Tamura K., Stecher G., and Kumar S. (2021) MEGA11: Molecular Evolutionary Genetics Analysis version 11. Molecular Biology and Evolution 38:3022-3027.Tobias I., Shevchenko O., Kiss B., Bysov A., Snihur H., Polischuk V., Salanki K., Palkovics L. Comparison of the nucleotide sequences of Wheat dwarf virus (WDV) isolates from Hungary and Ukraine// Polish Soc Microbiologists. – 2011. – Vol.60. – P. 125–131.Tobias I., Shevchenko O., Kiss B., Bysov A., Snihur H., Polischuk V., Salanki K., Palkovics L. Comparison of the nucleotide sequences of Wheat dwarf virus (WDV) isolates from Hungary and Ukraine// Polish Soc Microbiologists. – 2011. – Vol.60. – P. 125–131.Trzmiel K., Klejdysz T. Detection of barleyand wheat-specific forms of Wheat dwarf virus in it's vector Psammotettix alienus by duplex PCR assay// Journal of Plant Protection Research. – 2018. – Vol.58 (1). – P.54-57.Trzmiel K., Klejdysz T. Detection of barleyand wheat-specific forms of Wheat dwarf virus in its vector Psammotettix alienus by duplex PCR assay// Journal of Plant Protection Research. – 2018. – Vol.58 (1). – P. 54–57.Wang L., Liu Y., Wang X.-F. Detection of Wheat dwarf virus by TaqMan LNA probe real-time PCR// Acta Phytopathologica Sinica. – 2016. – Vol. 46 (3). – P. 313–319.Wang L., Liu Y., Wang X.-F. Detection of Wheat dwarf virus by TaqMan LNA probe real-time PCR// Acta Phytopathologica Sinica. – 2016. – Vol. 46 (3). – P. 313–319.Wei S., Liu L., Chen G., Yang H., Huang L., Gong G., Luo P., Zhang M. Molecular evolution and phylogeographic analysis of Wheat dwarf virus// Front. Microbiolog y. – 2024. – 15:1314526/ doi: 10.3389/fmicb.2024.1314526.Wei S., Liu L., Chen G., Yang H., Huang L., Gong G., Luo P., Zhang M. Molecular evolution and phylogeographic analysis of Wheat dwarf virus// Front. Microbiolog y. – 2024. – 15:1314526/ doi: 10.3389/fmicb.2024.1314526.Wu B., Melcher U., Guo X., Wang X., Fan L., Zhou G. Assessment of codivergence of Mastreviruses with their plant hosts// BMC Evolutionary Biology. – 2008, 8, 335.Wu B., Melcher U., Guo X., Wang X., Fan L., Zhou G. Assessment of codivergence of Mastreviruses with their plant hosts// BMC Evolutionary Biology. – 2008, 8, 335.Zhang P., Liu Y., Liu W., Massart S., Wang X. Simultaneous detection of Wheat dwarf virus, Northern cereal mosaic virus, Barley yellow striate mosaic virus and Rice black-streaked dwarf virus in wheat by multiplex RT-PCR// Journal of Virological Methods. – 2017. – Vol. 249. – P. 170–174.Zhang P., Liu Y., Liu W., Massart S., Wang X. Simultaneous detection of Wheat dwarf virus, Northern cereal mosaic virus, Barley yellow striate mosaic virus and Rice black-streaked dwarf virus in wheat by multiplex RT-PCR// Journal of Virological Methods. – 2017. – Vol. 249. – P. 170–174.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.