phytosanitaryФитосанитария. Карантин растенийPlant Health and Quarantine2782-327X10.69536/FKR.2020.42.64.001phytosanitary-11Research ArticleНАУЧНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯSCIENTIFIC RESEARCHИспользование ПЦР-систем для диагностики возбудителей бактериоза черная ножка картофеляUsing PCR Systems for the Diagnosis of Potato Blackleg Agentshttps://orcid.org/0000-0003-1596-8359УсковА. И.UskovA.

доктор сельскохозяйственных наук, главный научный сотрудник, заведующий отделом

п. Красково, г/о Люберцы, Московская область

Doctor of Agriculture, Leading Researcher and Head of Department

Kraskovo, Lyubertsy, Moscow region

korenevo2000@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4727-7141ШмыгляИ. В.ShmyglyaI.

старший научный сотрудник 

п. Красково, г/о Люберцы, Московская область

Senior Researcher

Kraskovo, Lyubertsy, Moscow region

i.shmyglya@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0732-5321СтахеевА. А.StakheevA.

кандидат биологических наук, научный сотрудник

г. Москва

PhD in Biology, Researcher

Moscow

stakheev.aa@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-6741-8175ЗавриевС. К.ZavriyevS.

доктор биологических наук, чл.-корреспондент РАН, заведующий отделом

г. Москва

Doctor of Biology, Corresponding Member of Russian Academy of Sciences, Head of Department

Moscow

szavriev@ibch.ruhttps://orcid.org/0000-0002-2329-7965ВарицевЮ. А.VaritsevYu.

кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник

п. Красково, г/о Люберцы, Московская область

PhD in Biology, Leading Researcher

Kraskovo, Lyubertsy, Moscow region

varyuriy@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-4680-9684ГалушкаП. А.GalushkaP.

кандидат сельскохозяйственных наук, старший научный сотрудник

п. Красково, г/о Люберцы, Московская область

PhD in Agriculture, Senior Researcher

Kraskovo, Lyubertsy, Moscow region

pavel_galushka@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9864-9945СусловаН. В.SuslovaN.

младший научный сотрудник 

п. Красково, г/о Люберцы, Московская область, Россия.

Junior Researcher

Kraskovo, Lyubertsy, Moscow region

susli4ik@yandex.ruФИЦ картофеля имени А.Г. ЛорхаРоссияA.G. Lorkh Russian Potato Federal Research CenterRussian FederationФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАНРоссияRAS Shemyakin and Ovchinnikov Institute of Bioorganic ChemistryRussian Federation202002062021046575Copyright © Усков А.И., Шмыгля И.В., Стахеев А.А., Завриев С.К., Варицев Ю.А., Галушка П.А., Суслова Н.В., 20212021Усков А.И., Шмыгля И.В., Стахеев А.А., Завриев С.К., Варицев Ю.А., Галушка П.А., Суслова Н.В.Uskov A., Shmyglya I., Stakheev A., Zavriyev S., Varitsev Y., Galushka P., Suslova N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://phytosanitary.vniikr.ru/jour/article/view/11

Черная ножка картофеля – повсеместно распространенный в Российской Федерации бактериоз, вызываемый пектолитическими бактериями рода Pectobacterium из семейства Enterobacteriaceae. В 2009 г. на территории России были идентифицированы возбудители черной ножки картофеля, относящиеся к роду Dickeya: Dickeya dianthicola и Dickeya solani. Ежегодный недобор урожая из-за данной болезни может составлять от 1–2 до 50–70%. Основной путь распространения патогенных бактерий связан с перемещением семенного материала. Для выявления и идентификации фитопатогенов, вызывающих черную ножку картофеля, необходима разработка и оптимизация для практического использования высокочувствительных лабораторных методов. В 2019 г. в рамках Федеральной научно-технической программы (ФНТП) развития сельского хозяйства на 2017–2025 гг. Институтом биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН и Федеральным исследовательским центром картофеля имени А.Г. Лорха (ФИЦ картофеля) были разработаны новые тест-системы в формате полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ) для диагностики бактерий, вызывающих черную ножку картофеля, с аналитической чувствительностью выявления ДНК патогенов на уровне 10–50 копий плазмиды, содержащей специфический ПЦР-продукт, на реакцию. В статье представлены результаты сравнительных испытаний новых тест-систем для диагностики бактерий Pectobacterium atrosepticum, Dickeya dianthicola и Dickeya solani. При тестировании 20 сортообразцов семенного картофеля, поступивших в Испытательную лабораторию ФИЦ картофеля от производителей из 4 регионов Российской Федерации, в 15 случаях показано полное совпадение результатов анализа при использовании рутинных и новых испытуемых тест-систем.

Blackleg of potato is a bacteriosis widespread in the Russian Federation caused by pectolytic bacteria of the genus Pectobacterium, Enterobacteriaceae family. In 2009, Dickeya spp. agents of potato blackleg were identified in Russia: Dickeya dianthicola and Dickeya solani. The annual yield shortfall due to this disease can reach from 1–2 to 50–70%. The main pathway for the pathogen bacteria is connected to seed material movement. The detection and identification of plant pathogens causing potato blackleg require the design and optimization of highly sensitive laboratory methods for practical use. In 2019, within the framework of the Federal Scientific and Technical Program (FSTP) of agriculture development for 2017–2025, the RAS Shemyakin and Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry and A.G. Lorkh Russian Potato Federal Research Center designed new test systems in real-time PCR (RT-PCR) for the diagnosis of bacteria causing potato blackleg, with analytical sensitivity for detecting the pathogen DNA at the level of 10–50 copies of plasmids, containing a specific PCR product, per reaction. The article presents the results of comparative testing of the new test systems for the diagnosis of the bacteria Pectobacterium atrosepticum, Dickeya dianthicola and Dickeya solani. When testing 20 varieties of seed potatoes delivered to the Testing Laboratory of A.G. Lorkh Russian Potato Federal Research Center by manufacturers from 4 regions of the Russian Federation, in 15 cases, complete coincidence of the analysis results was shown when using routine and new test systems.

Черная ножка картофеляПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ)диагностикатест-система.Blackleg of potatoreal-time PCR (RT-PCR)diagnosistest systemСтатья подготовлена в рамках ФНТП развития сельского хозяйства на 2017–2025 гг. (подпрограмма «Развитие селекции и семеноводства картофеля в Российской Федерации»).ReferencesЗащита картофеля от болезней, вредителей и сорняков / В.Г. Иванюк, С.А. Банадысев, Г.К. Журомский. – Минск: Белпринт, 2005. – 696 с.Ivanyuk V.G., Banadysev S.A., Zhuromsky G.K. Protecting potatoes from diseases, pests and weeds [Zashita kartofelya ot bolezney, vrediteley i sornyakov]. Minsk: Belprint, 2005. 696 p. (In Russian.)Болезни, вредители, сорняки картофеля и мероприятия по борьбе с ними / В.Н. Зейрук, С.В. Жевора, С.В. Васильева, Г.Л. Белов, В.И. Долженко, М.А. Кузнецова, Б.В. Анисимов, С.Н. Еланский. – М.: ФГУП «Издательство «Наука», 2020. – 332 с.Zeyruk V.N., Zhevora S.V., Vasilyeva S.V., Belov G.L., Dolzhenko V.I., Kuznetsova M.A., Anisimov B.V., Elansky S.N. Potato diseases, pests, weeds and measures to control them [Bolezni, vrediteli, sornyaki kartofelya i meropriyatiya po borbe s nimi]. M.: FSUE “Publishing house “Nauka”, 2020. 332 p. (In Russian.)Карлов А.Н., Зотов В.С., Пехтерева Э.Ш., Матвеева Е.В., Джалилов Ф.С., Фесенко И.А., Карлов Г.И., Игнатов А.Н. Dickeya dianthicola – новый для России бактериальный патоген картофеля // Известия ТСХА. – 2010. – № 3. – С. 134–141.Karlov A.N., Zotov V.S., Pekhtereva E.S., Matveeva E.V., Dzhalilov F.S., Fesenko I.A., Karlov G.I., Ignatov A.N. Dickeya dianthicola – new for Russia bacterial pathogen of potatoes [Dickeya dianthicola – novy dlya Rosii bakterialny patogen kartofelya]. Izvestiya TSKhA. 2010; 3: 134–141. (In Russian.)Карлов А.Н., Игнатов А.Н., Карлов Г.И., Пехтерева Э.Ш., Матвеева Е.В., Шаад Н.В., Варицев Ю.А., Джалилов Ф.С. Диагностика бактериального патогена картофеля Dickeya dianthicola // Известия ТСХА. – 2011. – № 3. – С. 38–48.Karlov A.N, Ignatov A.N, Karlov G.I, Pekhtereva E.S., Matveeva E.V, Shaad N.V, Varitsev Y.A., Jalilov F.S. Diagnosis of the potato bacterial pathogen Dickeya dianthicola [Diagnostika bakterialnogo patogena kartofelya Dickeya dianthicola]. Izvestiya TSKhA. 2011; 3: 38–48. (In Russian.)Игнатов А.Н., Лазарев А.М., Панычева Ю.С., Проворов Н.А., Чеботарь В.К. Бактериальные патогены картофеля рода Dickeya: мини-обзор по систематике и этиологии заболеваний // Сельскохозяйственная биология. – 2018. – Т. 53, № 1. – С. 123–131.Ignatov A.N., Lazarev A.M., Panycheva Yu.S., Provorov N.A., Chebotar V.K. Potato bacterial pathogens of the genus: mini-review on the taxonomy and etiology of diseases [Bakterialnye patogeny kartofelya roda Dickeya: mini-obzor po sistematike i etilologii zabolevaniy]. Agricultural Biology. 2018; 53 (1): 123–131. (In Russian.)Toth I.K., van der Wolf J.M., Saddler G., Lojkowska E., Hélias V., Pirhonen M., Tsror L., Eiphinstone J.G. Dickeya species: an emerging problem for potato production in Europe // Plant Pathology. – 2011. – Vol. 60. – P. 385–399.Toth I.K., van der Wolf J.M., Saddler G., Lojkowska E., Hélias V., Pirhonen M., Tsror L., Eiphinstone J.G. Dickeya species: an emerging problem for potato production in Europe. Plant Pathology. 2011; 60: 385–399.Игнатов А.Н., Карлов А.Н., Джалилов Ф.С., Карандашов А.Е., Князькина М.С., Корнев К.П., Пехтерева Э.Ш. Распространение в России черной ножки картофеля, вызываемой бактериями р. Dickeya // Защита и карантин растений. 2014. – № 11. – С. 41–43.Ignatov A.N., Karlov A.N., Jalilov F.S., Karandashov A.E., Knyazkina M.S., Kornev K.P., Pekhtereva E.S. The spreading in Russia of potato blackleg caused by Dickeya spp. [Rasprostranenie v Rossii chernoy nozhki kartofelya vyzyvaemoy bakteriyami roda Dickeya]. Plant protection and quarantine. 2014; 11: 41–43. (In Russian.)Ареалы и зоны вредоносности основных бактериозов растений на территории России и сопредельных стран / А.М. Лазарев, Е.Н. Мысник, Ю.А. Варицев, И.А. Зайцев, А.П. Кожемяков, Ф.А. Попов, С.А. Волгарев, В.К. Чеботарь. – Санкт-Петербург: ВИЗР, 2017. – 136 c.Lazarev A.M., Mysnik E.N., Varitsev Y.A., Zaitsev I.A., Kozhemyakov A.P., Popov F.A., Volgarev S.A., Chebotar V.K. Areas and zones of harmfulness of the main plant bacterioses on the territory of Russia and neighboring countries [Arealy i zony vredonosnostu osnovnykh bakteriozov rasteniy na territorii Rossii i sopredelnykh stran]. St. Petersburg: VIZR, 2017. 136 p. (In Russian.)Защита картофеля от болезней, вредителей и сорняков / Б.В. Анисимов, Г.Л. Белов, Ю.А. Варицев, С.Н. Еланский, Г.К. Журомский, С.К. Завриев, В.Н. Зейрук, В.Г. Иванюк, М.А. Кузнецова, М.П. Пляхневич, К.А. Пшеченков, Е.А. Симаков, Н.П. Склярова, З. Сташевски, А.И. Усков, И.М. Яшина. – М.: Картофелевод, 2009. – 272 с.Anisimov B.V., Belov G.L., Varitsev Y.A., Elansky S.N., Zhuromsky G.K., Zavriev S.K., Zeyruk V.N., Ivanyuk V.G., Kuznetsova M.A., Plyakhnevich M.P., Pshechenkov K.A., Simakov E.A., Sklyarova N.P., Stashevsky Z., Uskov A.I., Yashina I.M. Protecting potatoes from diseases, pests and weeds [Zashita kartofelya ot bolezney, vrediteley i sornyakov]. M.: Kartofelevod, 2009. 272 p. (In Russian.)Надточий И.Н., Лазарев А.М., Зайцев И.А., Варицев Ю.А. К вопросу распространенности и вредоносности черной ножки картофеля, вызываемой бактериями рода Pectobacterium // В кн.: Картофелеводство. Сборник научных трудов. Материалы международной научно-практической конференции: «Методы биотехнологии в селекции и семеноводстве картофеля». – М.: ГНУ ВНИИКХ Россельхозакадемии, 2014. – С. 225–230.Nadtochiy I.N., Lazarev A.M., Zaitsev I.A., Varitsev Y.A. On the prevalence and harmfulness of blackleg of potato caused by bacteria of the genus Pectobacterium [K voprosu o rasprostranennosti y vredonosnosti chernoy nozhki kartofelya, vyzyvayemoy bakteriyami roda Pectobacterium]. Potato growing. Collection of scientific papers. Materials of the international scientific and practical conference: “Methods of biotechnology in breeding and seed production of potatoes.” М.: GNU VNIIKH Russian Agricultural Academy, 2014: 225–230. (In Russian.)Игнатов А.Н. Необходимо усилить борьбу с бактериозами картофеля // Картофель и овощи. – 2011. – № 5. – С. 28–29.Ignatov A.N. It is necessary to increase the control of potato bacteriosis [Neobhodimo usilit borbu s bakteriozami kartofelya]. Potatoes and vegetables. 2011; 5: 28–29. (In Russian.)Зайцев И.А., Варицев Ю.А., Лазарев А.М., Галушка П.А., Варицева Г.П. Мониторинг скрытых (латентных) форм распространения возбудителей черной ножки и кольцевой гнили картофеля в Российской Федерации // В кн.: Сборник научных трудов по итогам международной научно-практической конференции «Сельскохозяйственные науки: научные приоритеты ученых» (г. Пермь, 25 ноября 2016 г.). – Пермь, 2016. – № 1. – С. 39–56.Zaitsev I.A., Varitseva Yu.A., Lazarev A.M., Galushka P.A., Varitseva G.P. Monitoring of latent forms of spread of potato black leg and ring rot pathogens in the Russian Federation [Monitoring skrytykh (latentnykh) form rasprostraneniya vozbuditeley chernoy nozhki i koltsevoy gnili kartofelya v Rossiyskoy Federatsii]. Collection of scientific papers on the results of the international scientific and practical conference “Agricultural Sciences: Scientific Priorities of Scientists” (Perm, November 25, 2016). Perm, 2016. No. 1: 39–56. (In Russian.)Межгосударственный стандарт ГОСТ 33996-2016 «Картофель семенной. Технические условия и методы определения качества». – М.: Стандартинформ, 2017. – 31 с.Interstate standard GOST 33996-2016 “Seed potatoes. Technical conditions and methods for determining quality” [Kartofel semennoy. Tehnicheskiye usloviya i metody opredeleniya kachestva]. M.: Standardinform, 2017. 31 p. (In Russian.)Усков А.И., Варицев Ю.А., Варицева Г.П., Галушка П.А., Ускова Л.Б., Анисимов Б.В. Современные тест-системы для лабораторной диагностики вирусных и бактериальных патогенов картофеля // В кн.: Селекция и семеноводство картофеля // Монография / Кол. авт. под ред. С.В.Жеворы, Е.А. Симакова, Б.В. Анисимова. – Чебоксары, 2020. – С. 131–138.Uskov A.I., Varitsev Yu.A., Varitseva G.P., Galushka P.A., Uskova L.B., Anisimov B.V. Modern test systems for laboratory diagnostics of viral and bacterial pathogens of potatoes [Sovremennye test-sistemy dlya laboratornoy diagnostiki virusnykh I bakterialnykh patogenov kartofelya]. Potato breeding and seed production. Monograph. Col. ed. S.V. Zhevory, E.A. Simakova, B.V. Anisimova. Cheboksary, 2020: 131–138. (In Russian.)Варицев Ю.А., Зайцев И.А., Карлов А.Н., Варицева Г.П., Усков А.И. Иммуноферментный анализ возбудителей черной ножки картофеля // Картофель и овощи. – 2014. – № 6. – С. 28–29.Varitsev Yu.A., Zaitsev I.A., Karlov A.N., Varitseva G.P., Uskov A.I. Enzyme-linked immunosorbent assay of the potato blackleg agents [Immunifermentny analiz vozbuditeley chernoy nozhki kartofelya]. Potatoes and vegetables. 2014; 6: 28–29. (In Russian.)Safenkova I.V., Zaitsev I.A., Varitsev Yu.A., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Lateral flow immunoassay for rapid diagnosis of potato blackleg caused by Pectobacterium atrosepticum // Biosciences Biotechnology Research Asia. – 2015. – Vol. 12, № 3. – P. 1937–1945.Safenkova I.V., Zaitsev I.A., Varitsev Yu.A., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Lateral flow immunoassay for rapid diagnosis of potato blackleg caused by Pectobacterium atrosepticum // Biosciences Biotechnology Research Asia. 2015; 12 (3): 1937–1945.Safenkova I.V., Zaitsev I.A., Varitsev Yu.A., Byzova N.A., Drenova N.V., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Development of a lateral flow immunoassay for rapid diagnosis of potato blackleg caused by Dickeya species // Analytical and Bioanalytical Chemistry, Springer-Verlag Berlin Heidelberg. – 2017. – Vol. 409. – P. 1915–1927.Safenkova I.V., Zaitsev I.A., Varitsev Yu.A., Byzova N.A., Drenova N.V., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Development of a lateral flow immunoassay for rapid diagnosis of potato blackleg caused by Dickeya species. Analytical and Bioanalytical Chemistry, Springer-Verlag Berlin Heidelberg. 2017; 409: 1915–1927.Методические указания по диагностике возбудителей черной ножки и кольцевой гнили картофеля методами иммуноферментного анализа, иммунофлуоресцентной микроскопии и полимеразной цепной реакции / Варицев Ю.А., Усков А.И., Белов Г.Л., Варицева Г.П., Завриев С.К., Аршава Н.В., Зайцев В.В. – М.: ВНИИКХ, 2003. – 30 с.Varitsev Yu.A., Uskov A.I., Belov G.L., Varitseva G.P., Zavriev S.K., Arshava N.V., Zaitsev V.V. Methodology guidelines for the diagnosis of potato black leg and ring rot causative agents by enzyme-linked immunosorbent assay, immunofluorescence microscopy and polymerase chain reaction [Metodicheskiye ukazaniya po diagnostike vozbuditeley chernoy nozhki I koltsevoy gnili kartofelya metodami immunofermentnogo analiza, immunofluorestsentnoy mikroskopii I polimeraznoy tsepnoy reaktsii]. M.: VNIIKH, 2003. 30 p. (In Russian.)Khayi S., Blin P., Chong T.M., Chan K.G., Faure D. Complete genome anatomy of the emerging potato pathogen Dickeya solani type strain IPO 2222 (T) // Standards in Genomic Sciences. – 2016. – Vol. 11. – P. 87. – URL: https://doi.org/10.1186/s40793-016-0208-0.Khayi S., Blin P., Chong T.M., Chan K.G., Faure D. Complete genome anatomy of the emerging potato pathogen Dickeya solani type strain IPO 2222 (T). Standards in Genomic Sciences. 2016; 11: 87. URL: https://doi.org/10.1186/s40793-016-0208-0.Shneider M.M., Kabanova A.P., Korzhenkov A.A., Miroshnikov K.K., Thi N.H.V., Toshchakov S.V., Miroshnikov K.A., Ignatov A.N. Draft genome sequence of Pectobacterium atrosepticum PB72 and complete genome sequence of the specific bacteriophage PP90 // Genome Announcements. – 2018. – Vol. 6: e00473-18. – URL: https://doi.org/10.1128/genomeA.00473-18.Shneider M.M., Kabanova A.P., Korzhenkov A.A., Miroshnikov K.K., Thi N.H.V., Toshchakov S.V., Miroshnikov K.A., Ignatov A.N. Draft genome sequence of Pectobacterium atrosepticum PB72 and complete genome sequence of the specific bacteriophage PP90. Genome Announcements. 2018; 6: e00473-18. URL: https://doi.org/10.1128/genomeA.00473-18.Voronina M.V., Kabanova А.Р., Shneider М.М., Korzhenkov А.А., Toschakov S.V., Miroshnikov К.К., Miroshnikov К.А., Ignatov A.N. First report of Pectobacterium carotovorum subsp. brasiliense causing blackleg and stem rot disease of potato in Russia // Plant Disease. – 2019. – V. 103, No. 2. – P. 364.Voronina M.V., Kabanova А.Р., Shneider М.М., Korzhenkov А.А., Toschakov S.V., Miroshnikov К.К., Miroshnikov К.А., Ignatov A.N. First report of Pectobacterium carotovorum subsp. brasiliense causing blackleg and stem rot disease of potato in Russia. Plant Disease. 2019; 103 (2): 364.Карандашов В. Pectobacterium carotovorum subsp. brasiliensis – основной бактериальный патоген картофеля осенью 2017 г. – Москва, 2017. – 8 с. URL: https://docplayer.ru/140501832-Pectobacterium-carotovorum-subsp-brasiliensis-osnovnoy-bakterialnyy-patogen-kartofelya-osenyu-2017-g.html (дата обращения: 29.06.2020).Karandashov V. Pectobacterium carotovorum subsp. brasiliensis – major bacterial pathogen of potatoes in autumn 2017 [Pectobacterium carotovorum subsp. brasiliensis – osnovnoy bakterialny patogen kartofelya osenyu 2017]. Moscow, 2017. 8 p. URL: https://docplayer.ru/140501832-Pectobacterium-carotovorum-subsp-brasiliensis-osnovnoy-bakterialnyy-patogen-kartofelya-osenyu-2017-g.html (last accessed: 29.06.2020). (In Russian.)Стахеев А.А., Чигарева М.С., Усков А.И., Шмыгля И.В., Варицев Ю.А., Галушка П.А., Завриев С.К. Разработка новых систем ПЦР-идентификации некарантинных патогенов картофеля (Solanum tuberosum L.), распространенных на территории России // Сельскохозяйственная биология. – 2020. – Т. 55, № 1. – С. 77–86.Stakheev A.A., Chigareva M.S., Uskov A.I., Shmyglya I.V., Varitsev Yu.A., Galushka P.A., Zavriev S.K. Development of new PCR systems for identification of non-quarantine potato pathogens (Solanum tuberosum L.) widespread in Russia [Razrabotka novykh system PCR-identifikatsii nekarantinnykh patogenov kartofelya (Solanum tuberosum L.), rasprostranennykh na territorii Rossii]. Agricultural biology. 2020; 55 (1): 77–86. (In Russian.)СТО ВНИИКР 4.009-2013 «Возбудитель бурой бактериальной гнили картофеля Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al. Методы выявления и идентификации» / п. Быково, Московская обл.: ФГБУ «ВНИИКР», 2013. – 69 c.STO VNIIKR 4.009-2013 “Potato brown rot agent Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al. Detection and identification methods” [Vozbuditel buroy bakterialnoy gnili kartofelya Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al. Metody vyavleniya i identifikatsii]. Bykovo, Moscow region: FGBU “VNIIKR”, 2013. 69 p. (In Russian.)Bustin S.A., Benes V., Garson J.A., Hellemans J., Huggett J., Kubista M., Mueller R., Nolan T., Pfaffl M.W., Shipley G.L., Vandesompele J., Wittwer C.T. The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR // Clinical Chemistry. – 2009. – Vol. 55, No. 4. – P. 611–622. – URL: https://doi.org/10.1373/clinchem.2008.112797.Bustin S.A., Benes V., Garson J.A., Hellemans J., Huggett J., Kubista M., Mueller R., Nolan T., Pfaffl M.W., Shipley G.L., Vandesompele J., Wittwer C.T. The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR. Clinical Chemistry. 2009. 55 (4): 611–622. URL: https://doi.org/10.1373/clinchem.2008.112797.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.